酶联免疫法（ELISA）是一种通过抗体与抗原之间的相互作用来检测目标物质的技术。其核心步骤包括：包被抗体、样本添加、酶标记和显色反应。这种方法的灵敏度可高达0.1 ng/mL，非常适合于疾病诊断、食品安全监测等多个领域。

在样本准备方面，血清需通过离心去除纤维蛋白，而细胞培养上清则可利用0.22μm滤膜进行杂质去除。为了获得最佳结果，有一些实用技巧值得注意：

• 冻存样本在检测前需在37℃复温30分钟。
• ELISA试剂盒的选择要谨慎，避免显色反应方面的常见问题。

常见问题解答：

• 问：ELISA检测需要多少样本量？
  答：通常需要50-100μL的血清，而细胞上清则建议浓缩2-5倍。
• 问：如何避免假阳性结果？
  答：在封闭时使用5%BSA溶液，洗涤液中需添加0.05% Tween-20。
• 问：国产与进口试剂盒差异大吗？
  答：核心靶标建议选择进口产品（如R&D Systems），常规指标则可以选择性价比更高的国产品牌（如碧云天）。

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