2024年12月18日，复旦大学上海医学院蔡国响教授团队在Journal of Hematology & Oncology期刊（IF=295）上发表了题为“myCAF-derived exosomal PWAR6 accelerates CRC liver metastasis via altering glutamine availability and NK cell function in the tumor microenvironment”的研究论文。该研究揭示了肌成纤维细胞（myCAFs）衍生的外泌体LncRNA PWAR6如何调节肿瘤微环境（TME）中的谷氨酰胺可用性，从而加速结直肠癌（CRC）肝转移，同时影响自然杀伤（NK）细胞功能。研究结果表明，靶向抑制PWAR6结合FAPI治疗，在临床前模型中有效减少了肝转移，对临床管理具有良好的治疗潜力。

汉恒生物有幸为本研究提供了三种过表达质粒，包括HA-ubiquitin、Myc-NRF2和Flag-Keap1，进一步推动了这一重要研究的进展。

研究成果

1. myCAFs增强CRC细胞的干细胞性并促进迁移

为了探讨癌症相关成纤维细胞（CAFs）在CRC中的作用，作者分析了GSE166555和GSE178318单细胞测序数据，发现CAFs在肝转移CRC患者中的比例显著高于无肝转移患者。myCAFs在CRLM患者中显著增多，其生物标志物α-SMA、FAP和Collagen I的表达均明显高于正常成纤维细胞（NFs）。研究表明myCAFs提高了CRC细胞的干性并促进了其在体外的迁移能力，强调了myCAFs在CRC转移中的重要性。

2. myCAF衍生的外泌体PWAR6促进CRC的干性和转移

研究中发现myCAF-Exo通过促进CRC细胞的迁移和干性来增强其转移能力。高水平的lncRNA PWAR6在myCAF-Exo中被检测到，使得CRC细胞的迁移和干性显著增强。敲低PWAR6可显著抑制CRC细胞的转移能力，这一发现为理解myCAF与CRC细胞之间的相互作用提供了新的视角。

3. exo-PWAR6在CRC患者中的表达及其临床意义

使用68Ga-FAPI正电子发射断层扫描技术，作者对CRLM患者组织样本进行了调查，结果显示PWAR6的表达与SUVmax值呈显著相关。研究发现，PWAR6高表达患者的生存期显著低于低表达患者，PWAR6不仅在癌症发展中起到关键作用，也可能成为潜在的预后评分指标。

4. myCAF来源的exo-PWAR6通过上调SLC38A2增强CRC细胞的谷氨酰胺摄取

研究表明，myCAF-Exo与正常成纤维细胞之间在谷氨酰胺代谢途径上存在显著差异。PWAR6的表达与SLC38A2的上调相关，进而促进CRC细胞对谷氨酰胺的摄取，增强其迁移和干性。这一机制的阐明为CRC的代谢重编程提供了新的理论依据。

5. PWAR6阻断NRF2泛素化和降解

通过质谱分析，研究发现PWAR6与NRF2相互结合，调节NRF2的稳定性，进而影响其在翻译后的降解过程。实验表明，PWAR6的稳定对NRF2的表达和功能至关重要，进一步揭示了PWAR6在肿瘤微环境中的作用机制。

6. NRF2通过转录调节SLC38A2促进CRC细胞对谷氨酰胺的摄取

NRF2作为转录因子能够调节SLC38A2的表达，进而促进CRC细胞对谷氨酰胺的摄取。研究还发现高表达的NRF2与CRC患者的临床病理特征密切相关，提示其作为潜在的治疗靶点。

7. PWAR6介导的NK细胞谷氨酰胺缺乏促进肿瘤免疫逃逸

研究发现PWAR6通过改变肿瘤细胞与NK细胞之间的谷氨酰胺代谢竞争，抑制NK细胞的活性，导致肿瘤的免疫逃逸。这一机制强调了代谢环境在肿瘤免疫逃逸中的重要性。

8. PWAR6是CRC的潜在治疗靶点

基于PWAR6在CRC中的关键角色，研究评估了其作为治疗靶点的潜力。尾静脉注射靶向PWAR6的抑制剂（ASO-PWAR6）大幅减轻了小鼠的肿瘤负担，显示了其在临床应用中的广阔前景。

总结而言，研究发现myCAF来源的特异性外泌体PWAR6不仅增强CRC细胞的干性与迁移能力，还有助于理解其在肿瘤微环境中的免疫逃逸机制。进一步的研究将致力于强力推动不朽情缘MG在CRC治疗领域的应用，使其成为一种新的、有效的治疗选择。