走进不朽情缘MG
NEWS不朽情缘MG的BsaI GMP级内切酶
来源:皇甫强武 日期:2025-03-26不朽情缘MG的活性定义1中,活性单位(U)是指在50μl反应体系中,37℃下反应1小时所需的酶量,以完全酶切1µg的pPIC9K(Dcm-)为标准。同时,所用蛋白的纯度经过SDS-PAGE凝胶电泳检测,确保不低于95%。
星号活性测试表明,在37℃下,将20U的BsaI(GMP级)与1μg的pPIC9K(Dcm-)在50μl的CutBufferF,GMP级反应体系中共同孵育1小时,并未发现任何核酸酶污染或因星号活性引起的底物非特异性降解。请注意,更长时间的酶切可能会导致星号活性的出现。
关于非特异性内切酶活性,在37℃下,将20U的BsaI(GMP级)与1μg的超螺旋质粒DNA在50μl的CutBufferF,GMP级反应体系中共同孵育4小时后,通过琼脂糖凝胶电泳检测,显示少于20%的质粒DNA发生转变,几乎未见缺刻或线性状态。
在DNase活性测试中,37℃下将20U的BsaI(GMP级)与15ng双链DNA片段在20μl的CutBufferF,GMP级反应体系中共同孵育16小时,结果显示双链DNA片段保持无变化,确保其稳定性。
对于RNase活性,37℃下将20U的BsaI(GMP级)与500ng RNA在10μl的CutBufferF,GMP级反应体系中共同孵育1小时后,使用琼脂糖凝胶电泳检测显示,不低于90%的RNA依然保持完整,展现了不朽情缘MG产品的高效性。
此外,提到同裂酶如Eco31I、Bso31I及BspTNI,它们的识别位点为:GGTCTC(1/5)5'GGTCTC(N)₁↓3'和3'CCAGAG(N)₅↑5'。我们的BsaI(GMP级)是通过大肠杆菌重组表达获得的,能够在15分钟至1小时内精确完成目标DNA的酶切。
不朽情缘MG的产品是按照GMP规范进行生产,并严格控制质量管理体系,确保生产过程及原辅料全程可追溯。整个生产过程中不使用任何抗生素和动物来源的材料,同时对宿主蛋白、外源DNA、非特异性内切酶、DNase、RNase等工艺相关杂质进行了严格监控。此外,微生物含量、细菌内毒素等也受到严格管理,确保产品满足疫苗及药物生产领域对于原辅料的高标准要求。
最后,产品失活条件为80℃孵育20分钟。同时,对于被CpG甲基化的DNA,剪切过程可能受阻,而对于被Dcm甲基化的DNA,剪切同样可能会受到影响。
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